叶祖新通过2003年的电视剧《情断上海滩》正式出道，2005年出演《李小环与苗翠花》当中的方世玉，2011年饰演《步步惊心》中的十爷，2012年在电视剧《新白发魔女传》当中饰演辛龙子，2013年出演《隋唐英雄传》薛丁山，2014年《犀利仁师》范大同。
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